按温控的要求:可分为冷冻离心机与常温离心机两种。这个主要取决于实验样品的需求,有些样品(如:蛋白质、细胞等)在温度过高的情况下会遭到破坏,所以要选择冷冻离心机,目前冷冻离心机的温控范围一般在-20℃~40℃之间
采用不同离心速度与时间,使不同沉降速度的颗粒分批分离;
差速离心法:
原理:采用逐渐增加离心速度或低速和高速交替进行离心,使沉降速度不同的颗粒在不同的分离速度及不同的离心时间下分批分离的方法,称为差速离心法。
当以一定离心力在一定的离心时间内进行离心时,在离心管底部就会得到和重颗粒的沉淀,分出的上清液在加上转速下再进行离心,又得到第二部分较大、较重颗粒的“沉淀”及含小和轻颗粒“上清液”,如此,多次离心处理,即能把液体中的不同颗粒较好分开。这时所得沉淀是不纯的,需经再悬浮和再离心(2—3次),才能得到较纯颗粒。
常用于从组织匀浆中分离细胞和病毒。
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等密度离心的原理:
不同颗粒存在浮力密度差时,在离心力场作用下,在密度梯度介质中,颗粒或向下沉降,或向上浮起,一直移动到与它们各自的密度恰好相等的位置上形成区带,从而使不同浮力密度的物质得到分离。
等密度离心的区别:
离心介质、密度梯度范围与密度梯度离心不同,欲分离的颗粒密度处于离心介质密度范围内。
等密度离心的介质有:
氯化铯、硫酸铯、溴化铯、三碘苯物等。
等密度离心的操作:介质溶液与样品液混合均匀,足够时间离心。
介质梯度不需预先制备,离心时把密度均一的介质液和样品混合后装入离心管,通过离心形成梯度,让颗粒在梯度中进行再分配。常用来分离提取核酸、亚细胞器和质粒。
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普通离心机的转速为3000~10000 r/min,用于收集易沉降的大颗粒物质,如红细胞、酵母菌等;